科学家创制油酸含质78%的棉花新种量
11月1日，山东棉花钻研核心遗传育种团队钻研员柳展基和华中农业大学棉花遗传改良团队教授金双侠正在《动物生物技术纯志》正在线颁发论文，初度报导了操做CRISPR/Cas9基因编辑技术创制出非转基因高油酸棉花新种量的钻研结果，为改良棉籽油品量和高油酸棉花分子育种奠定了根原。
该钻研以棉花GhFAD2-1A/D基因为靶标，划分正在其DUF3474和Fatty acid desaturase构造域设想了2个靶点，操做pRGEB32-GhU6.9-NPT II载体构建了GhFAD2-1A/D基因的双靶点编辑载体，通过农杆菌转化棉花品系Jin668，与得了35株独立的T0代再生植株，经PCR检测，发现25株（71.43%）含有编辑载体上的NPTII和Cas9基因。
操做Sanger测序检测孕育发作的渐变，发现2个靶点均有渐变发作。正在25株阳性独立植株中，有19株（有效率76%）正在目的位点检测到渐变。渐变类型以单碱基插入缺失为主，同时也检测到了长片段碱基缺失，为2个sgRNA怪异做用的结果。
操做PCR和Sanger测序检测T1植株，发现所有T0渐变均不乱遗传到T1代，同时也正在T1代中发现了新的渐变。特别重要的是，正在T1代中检测到了4个无载体挑选符号基因的渐变单株，被称为非转基因渐变株。
棉花基因组中含有21个GhFAD成员，做者操做Sanger测序具体阐明了19个潜正在的脱靶位点，结果未检测到脱靶效应。
操做GC-MS阐明了4个非转基因渐变单株种子的脂肪酸组分，取斗劲Jin668相比，渐变体种子中的油酸含质显著升高，亚油酸含质显著降低。以m20-2为例，油酸含质由13.94%（斗劲）进步到77.72%，亚油酸含质由58.62%（斗劲）降低到6.85%，同时棕榈酸含质也显著降低。
做者还检测了高油酸渐变体的次要农艺性状，发现敲除GhFAD2-1A/D基因其真不映响棉花产质、纤维品量、种子总油分含质和种子萌发率。
相关论文信息：hts://doi.org/10.1111/pbi.13507
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